人骨形成蛋白-2和骨保护素在小鼠成肌细胞中的共表达
目的构建人骨形成蛋白-2(BMP-2)和骨保护素(OPG)的共表达真核载体,研究其在小鼠成肌细胞C2C12中的表达. 方法以人骨肉瘤细胞系MG63的总RNA为模板,RT-PCR法获得人OPG的编码区cDNA,克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点,再将人BMP-2的编码区cDNA克隆入pIRES2-EGFP中的BstXⅠ位点,构建BMP-2和OPG的双顺反子真核表达载体pIRES2-BMP-2-OPG,在阳离子脂质体介导下转染C2C12细胞,Western blot法检测BMP-2和OPG的表达. 结果①获得人OPG编码区全长cDNA.②构建人BMP-2和OPG的双顺反子真核表达载体pIRES2-BMP-2-OPG.③经Western blot检测,pIRES2-BMP-2-OPG转染C2C12细胞后,细胞可稳定表达BMP-2和OPG. 结论构建了人BMP-2和OPG的共表达真核载体,并可在C2C12细胞中稳定表达,为应用BMP-2和OPG进行骨质疏松等疾病的治疗研究奠定了基础.
骨保护素、骨形成蛋白-2、基因表达
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R3(基础医学)
国家自然科学基金39870792
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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