抗炎合剂通过调控Beclin-1介导自噬减轻大鼠脓毒症急性肺损伤

摘要：

目的:探讨抗炎合剂对脓毒症急性肺损伤（ALI）大鼠的保护作用及其可能机制。方法:将40只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、脓毒症ALI模型组（模型组）、3-甲基腺嘌呤（3-MA）对照组、抗炎合剂预处理组，每组10只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症ALI大鼠模型；假手术组仅开腹、关腹，不给予穿孔结扎；两组均于术前连续3 d给予生理盐水灌胃和腹腔注射。3-MA对照组于制模前连续3 d给予生理盐水和自噬抑制剂3-MA 15 mg/kg腹腔注射。抗炎合剂预处理组于制模前连续3 d给予抗炎合剂8.8 mL/kg灌胃〔抗炎合剂组成：大黄15 g（后下）、黄连15 g、黄芩12 g、厚朴12 g、败酱草30 g〕，并腹腔注射生理盐水。各组于术后24 h取大鼠腹主动脉血处死，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清炎症细胞因子白细胞介素（IL-1β、IL-6）水平。取肺组织，收集支气管肺泡灌洗液（BALF），采用ELISA法检测IL-1β、IL-6水平；检测肺湿/干质量（W/D）比值；苏木素-伊红（HE）染色后，光镜下观察肺组织病理学改变；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肺组织自噬标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ（LC3-Ⅱ/Ⅰ）和Beclin-1蛋白表达；透射电镜下观察肺组织自噬小体。结果:与假手术组比较，模型组大鼠肺组织结构破坏严重，有大量炎症细胞浸润，肺W/D比值、血清和BALF中IL-1β、IL-6水平均明显升高，LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达均明显下调，自噬小体明显增加。3-MA对照组大鼠肺组织损伤程度较模型组更严重，肺W/D比值和血清、BALF中炎症细胞因子水平进一步升高，肺组织LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达仍较假手术组呈下调趋势，自噬小体较模型组减少。与模型组相比，抗炎合剂预处理组大鼠肺组织损伤明显减轻，少量炎症细胞浸润，肺W/D比值明显降低（7.07±1.02比11.33±1.85，
P<0.05），血清和BALF中IL-1β、IL-6水平均明显下降〔IL-1β（ng/L）：血清为26.04±3.86比40.83±5.46，BALF为17.75±2.02比26.86±4.32；IL-6（ng/L）：血清为91.28±10.15比129.44±13.05，BALF为76.06±7.51比120.91±7.47，均
P<0.05〕，肺组织LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达显著上调〔LC3-Ⅱ/Ⅰ比值：1.23±0.02比0.60±0.02，Beclin-1蛋白（Beclin-1/GAPDH）：2.37±0.33比0.62±0.05，均
P<0.05〕，且自噬小体数量明显增加。
结论:抗炎合剂能改善CLP致脓毒症大鼠肺损伤，降低炎症水平，其机制可能与通过上调Beclin-1表达介导自噬有关。

关键词：脓毒症、急性肺损伤、抗炎合剂、炎症因子、自噬

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资助基金：上海市进一步加快中医药传承创新发展三年行动计划项目ZY（2021-2023）-0209-11;Shanghai Three-year Action Plan for Further Accelerating the Inheritance, Innovation and Development of Traditional Chinese MedicineZY 2021-2023-0209-11

在线出版日期：2024-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：717-722