激动线粒体ALDH2抑制脓毒症小鼠肝损伤铁死亡机制的研究

摘要：

目的:观察盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的脓毒症小鼠肝损伤时不同途径铁死亡的发生，探讨线粒体乙醛脱氢酶2（ALDH2）是否通过抑制铁死亡减轻脓毒症肝损伤。方法:选取60只8周龄雄性C57BL/6J小鼠，按随机数字表法分为假手术（Sham)组、CLP组、铁死亡抑制剂铁抑素-1（Fer-1）组、ALDH2特异性激动剂Alda-1组、铁螯合剂右雷佐生（DXZ）组、二甲基亚砜（DMSO）组，每组10只。采用CLP法建立小鼠脓毒症肝损伤模型；Sham组仅开腹不结扎和穿刺盲肠。DMSO组、Fer-1组、DXZ组和Alda-1组分别于CLP术前1 h腹腔注射10 mL/kg 5% DMSO、5 mg/kg Fer-1、50 mg/kg DXZ和10 mg/kg Alda-1。术后24 h，麻醉小鼠取眼球血及肝组织。苏木素-伊红（HE）染色，镜下观察肝脏结构和炎症浸润情况；检测各组血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平及肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、活性氧（ROS）水平；蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肝组织ALDH2、铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、铁死亡抑制蛋白1（FSP1）和转铁蛋白受体1（TFR1）的蛋白表达。结果:与Sham组相比，CLP组小鼠术后24 h肝脏可见不同程度淤血、肝细胞排列紊乱及炎症细胞浸润；与CLP组相比，Fer-1组、DXZ组和Alda-1组小鼠肝脏形态学有改善，损伤减轻，炎症细胞浸润减少。与Sham组相比，CLP组血清ALT、AST水平及肝组织MDA、ROS含量和TFR1蛋白表达显著升高，肝组织SOD活性及ALDH2、GPX4和FSP1蛋白表达显著降低。与CLP组相比，Fer-1组、DXZ组和Alda-1组血清ALT、AST水平显著降低〔ALT（U/L）：45.76±10.81、37.30±2.98、36.40±12.75比73.06±12.20，AST（U/L）：61.57±2.69、52.41±6.92、56.05±8.29比81.59±5.46，均
P<0.05〕，肝组织MDA、ROS含量及TFR1蛋白表达显著降低〔MDA（μmol/L）：0.60±0.10、0.57±0.18、0.83±0.39比1.61±0.30，ROS（荧光强度）：270.34±9.64、276.02±62.33、262.05±18.55比455.38±36.07，TFR1/GAPDH：0.90±0.04、1.01±0.09、0.55±0.08比1.18±0.06，均
P<0.05〕，肝组织SOD活性及ALDH2、GPX4、FSP1蛋白表达显著升高〔SOD（kU/g）：88.77±8.20、88.37±4.47、93.43±7.24比50.27±3.57，ALDH2/GAPDH：1.10±0.15、1.02±0.07、1.14±0.07比0.70±0.04，GPX4/GAPDH：1.02±0.12、0.99±0.08、1.05±0.19比0.71±0.10，FSP1/GAPDH：1.06±0.24、1.02±0.08、0.93±0.09比0.66±0.03，均
P<0.05〕。DMSO组各指标与CLP组差异无统计学意义。
结论:GPX4和FSP1介导的铁死亡均参与脓毒症小鼠肝损伤，激动ALDH2、抑制铁死亡可减轻肝损伤，ALDH2可能通过调控GPX4和FSP1介导的铁死亡发挥保护作用。

关键词：线粒体乙醛脱氢酶2、脓毒症肝损伤、铁死亡

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资助基金：国家自然科学基金81770297;National Nature Science Foundation of China81770297

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：684-689