蛋白营养不良与能量营养不良状态下脓毒症大鼠凝血的变化

摘要：

目的 探讨蛋白营养不良和能量营养不良状态下脓毒症大鼠凝血的变化.方法 将108只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组,每组36只.正常喂养组给予含18%蛋白饲料27 g/d自由饮食;蛋白营养不良组给予含5%蛋白饲料27 g/d低蛋白自由饮食;能量营养不良组给予含18%蛋白饲料9 g/d低能量饮食.连续喂养4周后,从各组分别选取8只大鼠进行营养不良评价,称量体重以及胸腺、脾脏重量,应用流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞亚群比例和M1型巨噬细胞比例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆白细胞介素(IL-6、IL-10)水平.各组剩余28只大鼠用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,其中20只用于Kaplan-Meier生存分析;其余8只于术后8 h处死,采用ELISA法检测血浆IL-6、IL-10水平,应用流式细胞仪检测脾脏M1型巨噬细胞比例,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝脏组织因子(TF)及凝血酶原激活物抑制因子-1 (PAI-1)的mRNA表达.采用Pearson相关法对CLP术后大鼠TF、PAI-1的mRNA表达与IL-6进行相关性分析.结果 ① 4周喂养结束后,正常喂养组和蛋白营养不良组大鼠体重增加,而能量营养不良组丢失初始体重的25% ;蛋白营养不良组及能量营养不良组大鼠体重、胸腺和脾脏重量均明显低于正常喂养组.与正常喂养组和蛋白营养不良组比较,能量营养不良组大鼠脾脏CD3+ T淋巴细胞、CD4+ T淋巴细胞、M1型巨噬细胞比例以及血浆IL-6水平均明显升高〔CD3+ T淋巴细胞比例:(52.1±3.7)%比(46.9±3.9)%、(44.5±2.2)%,CD4+ T淋巴细胞比例:(35.0±3.6)%比(26.3±2.2)%、(25.1±2.3)%,M1型巨噬细胞比例:(8.7±2.0)%比(3.2±1.3)%、(4.2±1.1)%,IL-6(ng/L):129.4±16.2比48.1±10.0、53.0±8.3,均P＜0.05〕.② CLP术后7 d Kaplan-Meier生存分析显示,能量营养不良组大鼠全部死亡,7 d累积生存率明显低于正常喂养组和蛋白营养不良组〔0%(0/20)比35%(7/20)、55%(11/20),均P＜0.05〕.正常喂养组大鼠死亡率为65%,符合中度脓毒症死亡率,说明CLP模型制备成功.CLP术后,蛋白营养不良组大鼠血浆IL-6水平明显低于正常喂养组〔IL-6(ng/L):154.6±34.7比233.4±41.2,P＜0.05〕;能量营养不良组大鼠肝脏TF、PAI-1的mRNA表达和血浆IL-6水平均明显高于正常喂养组〔TF mRNA(2-ΔΔCT):4.5±2.2比1.1±0.7,PAI-1 mRNA(2-ΔΔCT):3.3±1.8比1.3±0.9,IL-6(ng/L):382.7±118.2比233.4±41.2,均P＜0.05〕,脾脏M1型巨噬细胞比例明显低于正常喂养组〔(8.9±2.4)%比(15.2±5.4)%,P＜0.05〕.各组大鼠血浆IL-10水平比较差异均无统计学意义.相关分析显示,CLP术后大鼠肝脏TF、PAI-1 mRNA表达与血浆IL-6水平均呈显著正相关(r1＝0.644、r2＝0.574,均P＜0.01).结论 长期持续应激(饥饿)导致大鼠持续慢性炎症状态,并在感染后刺激相关炎性因子释放及凝血系统激活,无持续应激的蛋白营养不良脓毒症大鼠炎性因子释放明显减少.

关键词：营养不良、脓毒症、炎症反应、凝血活化

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资助基金：辽宁省重点临床科室诊疗能力建设项目LNCCC-B01-2014 Fund program: Construction Project of Diagnosis and Treatment Ability of Key Clinical Departments in Liaoning Province LNCCC-B01-2014

在线出版日期：2019-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1113-1117