黄芩素通过抑制核转录因子-κB活性减轻小鼠肠缺血/再灌注致急性肺损伤

摘要：

目的 探讨黄芩素对小鼠肠缺血/再灌注(I/R)致急性肺损伤(ALI)的作用及机制.方法 按随机数字表法将24只清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠分为假手术(Sham)组、I/R组和黄芩素+I/R组,每组8只.采用夹闭系膜上动脉90 min后恢复灌注制备肠I/R诱发小鼠肺损伤模型;黄芩素+I/R组于制模前1h腹腔注射黄芩素100mg/kg;Sham组小鼠不钳夹血管,其余操作同I/R组.于再灌注4h后处死小鼠取下腔静脉血和肺组织标本.苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察小鼠肺组织病理学变化,并进行病理学评分;测定肺湿/干重(W/D)比值;采用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;采用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TNF-α和IL-6的mRNA表达水平;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织胞质核转录因子-κB(NF-κB)抑制因子-α(IκB-α)和胞核NF-κB的蛋白表达水平.结果 光镜下观察显示,Sham组小鼠肺泡结构完整,无明显病理学改变;I/R组小鼠肺组织结构严重破坏,肺泡壁明显增厚,肺间质水肿,大量炎性细胞浸润;黄芩素+I/R组小鼠肺泡及间质水肿程度明显减轻,有少量炎性细胞浸润.与Sham组比较,I/R组肺组织病理学评分、W/D比值明显升高,细胞凋亡指数显著增加,血清TNF-α、IL-6含量及其肺组织mRNA表达均明显增加,胞质IκB-α蛋白表达明显下降,胞核NF-κB蛋白表达明显升高;而给予黄芩素预处理可明显改善上述肠I/R诱导的肺组织损伤,表现为与I/R组比较,黄芩素+I/R组肺组织病理学评分、W/D比值明显降低[病理学评分(分):4.59±1.17比6.27±1.34,W/D比值:3.79±0.28比4.32±0.57],细胞凋亡指数显著下降[(4.85±2.47)％比(8.15±2.33)％],血清TNF-α、IL-6含量及其肺组织mRNA表达水平均明显下降[血清TNF-α (pg/L):124.18±30.49比167.72±38.65,IL-6(ng/L):1.65±0.69比2.43±0.57;肺组织TNF-αmRNA (2-△△Ct):4.75±2.38比7.69±2.32,IL-6 mRNA (2-△△Ct):16.45±4.39比27.69±6.82],胞质IκB-α蛋白表达明显升高(灰度值:0.47±0.11比0.27±0.09),胞核NF-κB蛋白表达明显下降(灰度值:0.57±0.13比1.07±0.34),差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 黄芩素可能通过抑制炎症反应和细胞凋亡,从而减轻肠I/R所致ALI.

关键词：黄芩素、肺损伤、急性、缺血/再灌注损伤、肠、炎症、凋亡、核转录因子-κB

所属期刊栏目：29

分类号：R4 ;R73

资助基金：National Natural Science Foundation of China 81300343国家自然科学基金81300343

在线出版日期：2017-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：228-232