丙戊酸钠对严重烫伤后肠屏障功能的保护作用及机制

摘要：

目的 探讨丙戊酸钠(VPA)对致死性烫伤大鼠肠屏障的保护作用及其机制.方法 清洁级雄性SD大鼠40只,按随机数字表法分为假烫(Sham)+生理盐水(NS)组、Sham+VPA组、烫伤(Scald) +NS组、Scald+VPA组4组,每组10只.将大鼠浸入80℃水中建立55％总体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤休克大鼠模型,Sham组大鼠浸入37℃水中相同时间;烫伤后即刻皮下注射300 mg/kg VPA或NS 0.25 mL.于伤后2h、6h处死大鼠取腹主动脉血和回肠组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肠组织血管内皮生长因子(VEGF)水平;检测异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)水平反映肠上皮屏障的通透性变化;采用Chiu肠屏障损伤评分评价肠黏膜组织形态学变化;采用免疫荧光和蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肠组织乙酰化组蛋白3第9位赖氨酸(Ac-H3K9)水平以及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、带状闭合蛋白1(ZO-1)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的蛋白表达.结果 与Sham+NS组相比,Scald+NS组大鼠伤后2h即表现出肠黏膜组织损伤,肠黏膜通透性增加,肠组织组蛋白乙酰化下降,ZO-1降解增加,HIF-1 α、VEGF及MCLK蛋白表达上调,ZO-1蛋白表达下调;且上述变化在伤后6h更为明显.VPA可明显逆转55％ TBSAⅢ度烫伤造成的肠黏膜损伤表现.与Scald+NS组相比,Scald+VPA组伤后2h上述逆转效果尚不明显;而6h肠黏膜损伤明显减轻[Chiu评分(分):2.03±0.27比3.12±0.15],肠黏膜通透性明显降低[FITC-dextran(μg/L):709±76比1 138±75],组蛋白乙酰化增加[Ac-H3K9(灰度值):1.55±0.12比0.48±0.12],ZO-1降解明显抑制(灰度值:0.69±0.12比0.43±0.16),VEGF水平和MLCK蛋白表达明显下调[VEGF (ng/mg):51.7±3.7比71.2±4.3,MLCK(灰度值):1.98±0.20比2.80±0.24],HIF-1 α蛋白在伤后2h和6h均明显下调(灰度值:2h为2.50±0.39比3.88±0.42,6h为1.83±0.42比4.42±0.41,均P＜0.05).结论 严重烧伤后肠黏膜组织组蛋白乙酰化及ZO-1水平降低,并引起肠屏障功能损害;VPA能提高组蛋白乙酰化及ZO-1水平,保护肠上皮屏障功能,其机制可能与VPA对HIF-1α及其下游靶基因VEGF和MLCK的抑制作用有关.

关键词：烧伤、肠屏障、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、丙戊酸钠、缺氧诱导因子1α

所属期刊栏目：29

分类号：R64;R74

资助基金：National Natural Science Foundation of China 81301607国家自然科学基金81301607

在线出版日期：2017-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：221-227