中药火把花根对油酸致急性肺损伤大鼠 气道紧密连接蛋白表达的影响

摘要：

目的：观察中药火把花根对急性肺损伤（ALI）大鼠支气管上皮紧密连接蛋白claudin-2和ZO-1表达的影响，探讨火把花根对ALI的保护机制。方法将24只健康成年清洁级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、ALI组、火把花根预处理组，每组8只。经尾静脉注射油酸0.04mL/kg复制大鼠ALI模型，对照组注射等量生理盐水（NS）；火把花根预处理组于制模前10d连续灌胃药物600mg·kg-1·d-1（2mL），对照组和ALI组灌胃等量NS。制模后4h取腹主动脉血、收集支气管肺泡灌洗液（BALF），测定血浆及BALF中蛋白含量，计算肺通透性指数（LPI）；处死大鼠取肺组织，测定肺湿/干质量（W/D）比值，苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察肺组织病理学变化，并进行肺损伤评分（LIS）；应用免疫组化法观察支气管黏膜上皮claudin-2和ZO-1的阳性表达及定位；应用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测支气管黏膜上皮claudin-2和ZO-1的蛋白表达。结果镜下显示：与对照组比较，ALI组大鼠肺组织损伤明显，细胞水肿，细胞间连接结构紊乱，LIS、W/D及LPI均显著升高〔LIS（分）：3.81±0.42比0.40±0.08，W/D：7.68±0.64比4.44±0.39，LPI：0.89±0.15比0.38±0.05，均P＜0.01〕；claudin-2和ZO-1主要表达在支气管上皮细胞，且ALI组表达强度较对照组明显减弱；WesternBlot显示，ALI组claudin-2和ZO-1的蛋白表达较对照组显著下调〔claudin-2蛋白（灰度值）：0.43±0.31比2.16±1.33，ZO-1蛋白（灰度值）：1.25±0.41比2.82±0.76，均P＜0.01〕。与ALI组比较，火把花根预处理可明显改善ALI大鼠肺损伤程度〔LIS（分）：1.22±0.39比3.81±0.42，W/D：4.62±0.84比7.68±0.64， LPI：0.46±0.07比0.89±0.15，均P＜0.01〕，且claudin-2和ZO-1的蛋白表达均明显上调〔claudin-2蛋白（灰度值）：2.98±0.91比0.43±0.31，ZO-1蛋白（灰度值）：2.35±0.51比1.25±0.41，均P＜0.01〕。结论火把花根可能通过上调支气管上皮细胞紧密连接蛋白claudin-2及ZO-1的表达，以减轻ALI时气道上皮损伤，从而起到肺脏的保护性作用。

关键词：肺损伤、急性、火把花根片、紧密连接蛋白、Claudin-2、ZO-1、气道屏障功能

所属期刊栏目：28

分类号：R28;R97

资助基金：国家自然科学基金81260583；宁夏回族自治区自然科学基金NZ10139

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：523-527