转染微小RNA-146a对肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

摘要：

目的 观察转染微小RNA-146a(miR-146a)对大鼠肺泡巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨转染miR-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用.方法 体外培养大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383,分别以25、50、100 nmol/L CyTM3标记的Pre-miRTM阴性对照转染细胞,选择转染效率最高的浓度作为实验浓度.将NR8383细胞分成两组,转染组转染50 nmol/L Pre-miRTM miR-146a前体,对照组转染50 nmol/L CyTM3标记的Pre-miRTM阴性对照,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染后细胞内miR-146a的mRNA表达.用脂多糖(LPS)1 mg/L刺激细胞6h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞培养上清液内TNF-α蛋白表达,采用RT-qPCR检测细胞内TNF-α mRNA表达.结果 以50 nmol/LCyTM3标记的Pre-miRTM阴性对照转染细胞效率最高,约为80％.与对照组(作为1)相比,转染组细胞内miR-146a的mRNA表达上调了(24.55±6.14)倍(P＜0.01).LPS刺激后,转染组细胞上清液TNF-α蛋白含量(ng/L)较对照组明显下降(211.5±30.4比616.6±42.3,P＜0.01),细胞内TNF-α mRNA表达下调了(47±6)％(P＜0.05).结论 转染miR-146a能下调肺泡巨噬细胞炎症因子TNF-α的表达,表明miR-146a能抑制LPS诱导肺泡巨噬细胞的炎症反应.

关键词：微小RNA-146a、肺泡巨噬细胞、肿瘤坏死因子-α

所属期刊栏目：25

分类号：R614.1;R734.2;R562.25

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2013-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：335-338