真核表达载体pCMV-(Kozak)TFPI的构建及其在内皮细胞中的表达

摘要：

目的 构建真核表达载体pCMV-(Kozak)TFPI并检测其在内皮细胞中的表达,为冠状动脉旁路移植和经皮冠状动脉内成形术中转染血管内皮细胞抗凝治疗作了实验和理论的探索.方法 用RT-PCR的方法提取人组织因子途径抑制因子(TFPI)基因,并引入Kozak序列,将(Kozak)TFPI亚克隆入pCMV质粒中.在阳离子脂质体介导下,转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC).RT-PCR、免疫荧光和Western blot检测HUVEC中外源TFPI基因mRNA和蛋白的表达.结果 (Kozak)TFPI成功克隆入pCMV中.RT-PCR、免疫荧光和Western blot检测到外源TFPI基因mRNA和蛋白的表达.结论 成功构建了pCMV-(Kozak)TFPI真核表达载体,并表达出相应的蛋白.

关键词：冠状动脉旁路移植术、经皮冠状动脉内成形术、组织因子途径抑制因子、基因、载体、转染

所属期刊栏目：11

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30571838

在线出版日期：2007-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：240-243