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10.16470/j.csst.201701013

谷氨酰胺补充和电刺激对C2C12肌管蛋白合成通路的影响

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目的:C2C12肌管为细胞模型,探讨电刺激模拟运动与谷氨酰胺补充对C2C12肌管蛋白质含量及mTOR通路的影响,进一步探明谷氨酰胺补充与蛋白质代谢之间的关系.方法:谷氨酰胺孵育分化5天的肌管48h后,给予一次电刺激(15V,30 ms,3 Hz,90 mm).分别在电刺激后0h、6h、18h和24h收样.实验共10组,单独对照组(Con);单独谷氨酰胺组(Gln);单独电刺激后不同时间点取样组(Es0、Es6、Es18、Es24);谷氨酰胺孵育加电刺激后不同时间点取样组(GM+Es0、Gln+Es6、GM+Es 18、GM+Es24).BCA法测定各组肌管蛋白含量;RT-PCR法测定各组mTOR mRNA表达量及其下游因子S6K1 mRNA表达量.结果:1)与Con相比,Gln组的蛋白含量、mTOR及S6K1 mRNA均显著升高(P<0.05).2)单独电刺激(Es)后,随收样时间延长,肌管蛋白含量呈现先下降后上升趋势.Es6极显著下降(P<0.01),Es18极显著上升(P<0.01).而mTOR和S6K1 mRNA的表达没有下降,呈现先上升后恢复正常的趋势.3)谷氨酰胺和电刺激(Gln+Es)联合作用后,无论是蛋白含量,还是mTOR及S6K1 mRNA表达,具有与单独电刺激相似的作用趋势,且G1n+Es各组数值均高于Es各组(P<0.05).此外,Es组mTOR表达在电刺激后18h达高峰,而GM+Es组在6h达高峰.结论:1)单独电刺激、单独补充谷氨酰胺、两者的联合作用,均可通过mTOR通路中mTOR mRNA和S6K1mRNA表达上升,增加蛋白合成,促进蛋白含量上升及肌管恢复.2)谷氨酰胺使电刺激后C2C12肌管mTOR mRNA表达提前,S6K1mRNA表达稳定处于高水平.

谷氨酰胺补充、mTOR、电刺激、C2C12肌管

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2017-04-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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