弓形虫srs19d基因敲除株的构建及其在宿主细胞中的生物学功能分析

摘要：

为探究弓形虫表面抗原1相关序列(SRS)蛋白家族新成员SRS19D的功能,本试验以弓形虫Ⅱ型Pru虫株为亲本,运用成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9)技术构建了PruΔsrs19d敲除虫株,并进行了噬斑试验、细胞内增殖试验、体外缓殖子转化试验、小鼠毒力试验和小鼠脑包囊检测试验.噬斑试验和细胞内增殖试验结果显示,与Pru虫株相比,PruΔsrs19d敲除虫株在人包皮成纤维(HFF)细胞上形成的噬斑显著变小(P＜0.05),纳虫泡内形成的速殖子个数显著减少(P＜0.05).体外缓殖子转化试验发现,与Pru虫株相比,PruΔsrs19d敲除虫株的体外缓殖子转化率极显著降低(P＜0.01).小鼠毒力试验结果显示,与Pru虫株相比,弓形虫PruΔsrs19d敲除虫株不会引起ICR小鼠的死亡(P＜0.05).小鼠脑包囊检测试验结果显示,与Pru虫株相比,PruΔsrs19d敲除虫株感染小鼠后形成的脑包囊数量极显著减少(P＜0.01).本试验成功构建了弓形虫PruΔsrs19d敲除虫株,发现srs19d基因在弓形虫的体外生长、复制、毒力和慢性感染中发挥重要作用,为进一步探究SRS19D的功能和作用机制提供参考.

关键词：弓形虫、表面抗原1相关序列(SRS)、srs19d、成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9)、生物学功能

所属期刊栏目：60

分类号：S852(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省杰出青年基金;江苏高校优势学科建设工程资助项目

在线出版日期：2024-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：10-17