基于吕氏泰勒虫4种靶基因的PCR检测方法比较
为筛选特异、敏感的吕氏泰勒虫(Theileria luwenshuni)PCR检测基因,本试验分别以吕氏泰勒虫核糖体小亚基RNA(18S rRNA)基因、主要表面蛋白(MPSP)、内转录间隔区(ITS)基因和线粒体细胞色素C氧化酶1(Cox 1)基因为靶基因进行PCR检测,并对特异性、敏感性和临床样本检出率进行对比.结果显示,4种靶基因引物均只可扩增出吕氏泰勒虫DNA,扩增不出卵形巴贝斯虫、中华泰勒虫和附红细胞体DNA,具有较好的特异性.以18S rRNA为靶基因的PCR检测方法的敏感性最高,检测量为9.82 × 103 copies/µL;以cox1为靶基因的PCR检测方法的敏感性最低,检测量为9.82 × 105 copies/μL.在此基础上对18S rRNA基因PCR扩增引物进行筛选,引物P3具有较好的特异性和敏感性,为最佳检测引物.临床绵羊血液样本的检测结果显示,以18S rRNA为靶基因的PCR检测方法的检出率最高,为33.33%(15/45),高于MPSP、ITS基因的26.67%(12/45)和cox1基因的22.22%(10/45).结果表明,以18S rRNA为靶基因的吕氏泰勒虫的PCR检测方法具有较好的特异性和敏感性,可用于吕氏泰勒虫病的诊断和流行病学调查.
吕氏泰勒虫、PCR检测方法、比较、18S rRNA
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S855.9(动物医学(兽医学))
吉林省科技发展计划YDZJ202101ZYTS196
2023-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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