塞内卡病毒多克隆抗体的制备及其在免疫组织化学中的初步应用

摘要：

为了制备纯度高、特异性强的塞内卡病毒(SVA)多克隆抗体并研究其在免疫组织化学(IHC)中的应用,本试验用甲醛溶液灭活SVA,将其与矿物油佐剂充分混合乳化后,接种兔制备多克隆抗体并测定中和抗体效价,经Protein A亲和层析介质纯化,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定抗体纯度,用斑点杂交法(Dot blot)鉴定抗体特异性;以该抗体作为一抗,应用IHC技术检测SVA感染猪的蹄部组织切片中抗原的表达情况.结果显示,制备的SVA多克隆抗体中和抗体效价为1∶1 024,纯化后的抗体经SDS-PAGE鉴定仅有分子量约55 kDa和25 kDa两条目的蛋白条带;Dot blot结果显示,该抗体特异性强,最低检测浓度为0.15μg/mL;IHC结果显示,该抗体在1∶500稀释时能够检测到组织切片中抗原的表达.结果表明,本试验制备的SVA多克隆抗体符合IHC技术要求,可为下一步SVA致病机理研究提供重要的试验材料.

关键词：塞内卡病毒、多克隆抗体、鉴定、免疫组织化学

所属期刊栏目：59

分类号：S834(家禽)

在线出版日期：2023-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：72-76