PCV-2和PCV-3 Cap蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达和鉴定

摘要：

为了实现猪圆环病毒2型(PCV-2)和3型(PCV-3)Cap蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中表达,本试验利用刚性连接肽连接PCV-2和PCV-3 Cap基因,构建杆状病毒转移载体pFastBac-PCV-2-3-Cap,双酶切验证正确后,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组杆粒.将重组杆粒转染SF9细胞(昆虫卵巢细胞),盲传3代,获得重组病毒.将重组病毒接种SF9细胞96 h后,通过细胞免疫荧光检测、Western blot和电镜观察对其进行验证,并利用噬斑法检测其效价.结果显示:成功构建重组质粒pFastBac-PCV-2-3-Cap,获得了重组杆粒rAcBacmid-PCV-2-3-Cap,并制备出重组杆状病毒rvAc-PCV-2-3-Cap.重组病毒感染SF9细胞后,目的蛋白成功表达,并可以形成病毒样颗粒,病毒效价为3.41 × 106 PFU/mL.本试验成功在昆虫细胞-杆状病毒系统中共表达了 PCV-2-3-Cap,为防治PCV-2和PCV-3混合感染的二联疫苗研究提供了数据支持.

关键词：PCV-2、PCV-3、重组质粒、杆状病毒、真核表达

所属期刊栏目：59

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：辽宁省国家级大学生创新创业训练计划项目;辽宁省百千万人才工程资助项目;锦州医科大学横向课题;锦州医科大学横向课题

在线出版日期：2023-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：55-59