巨型艾美耳球虫在4种细胞系中培养的比较

摘要：

为了选择适宜巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)培养的细胞系,本试验首先用DEAE-52纤维素纯化E.maxima第3代裂殖子,然后将其与不同传代细胞系叙利亚幼地鼠肾(BHK)细胞、鸡胚成纤维(DF-1)细胞、猪肾(PK-15)细胞、非洲绿猴肾(Vero)细胞分别在37℃和41℃培养,每隔15 min进行苏木精-伊红(H.E.)染色比较裂殖子入侵4种细胞所需时长;将裂殖子与4种细胞培养12 h,利用H.E.染色方法比较裂殖子入侵4种细胞的活力;通过比较裂殖子接种时长和接种剂量的试验筛选裂殖子入侵DF-1细胞的最佳培养条件.结果显示,在41℃培养温度下裂殖子入侵所需时长更短;在37℃和41℃培养温度下,裂殖子对DF-1细胞的入侵率均显著高于其他3种细胞(P＜0.05),裂殖子在与4种细胞培养期间均发育为裂殖体并释放出裂殖子,但未发育成卵囊;裂殖子接种DF-1细胞6 h后入侵率极显著高于4 h(P＜0.01),接种10 h入侵率最高,但与8 h无显著性差异(P＞0.05);当细胞数:裂殖子数为1:2.5时入侵率极显著增加(P＜0.01);在BHK、DF-1、PK-15、Vero四种细胞系中,DF-1细胞为最适宜进行E.maxima体外培养的细胞,在37℃、5％CO2条件下,用2.5倍细胞数的裂殖子接种细胞,共培养6 h可收集细胞进行相关试验检测.目前鸡球虫体外培养细胞系有限,而且细胞培养条件不统一,所以其入侵和发育存在不确定性,而E.maxima在这方面研究更少,因此,本试验可为探索新的鸡球虫细胞培养体系提供参考.

关键词：巨型艾美耳球虫、裂殖子、细胞系选择、H.E.染色

所属期刊栏目：59

分类号：S855.9(动物医学（兽医学）)

资助基金：北京市特色高水平骨干专业群项目;北京农业职业学院院级科研项目;北京农学院教改项目

在线出版日期：2023-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：41-46