利用CRISPR/Cas9技术构建gdf11基因敲除小鼠及其表型鉴定

摘要：

为了探讨敲除生长分化因子11(gdf11)基因对小鼠生长性状的影响,本试验根据gdf11基因序列设计向导RNA(sgRNA)并利用规律成蔟的短间隔回文重复序列和CRISPR相关蛋白(CRISPR/Cas9)基因编辑系统对该基因进行敲除,利用显微注射的方法获得gdf11敲除型F0代小鼠,通过聚合酶链式反应(PCR)和测序鉴定子代小鼠基因型.繁育后观察Fi代小鼠形态,并采用骨架染色方法观察不同基因型小鼠的性状.结果显示,成功构建了 gdf11基因敲除小鼠,并且通过繁育得到了野生型(gdf11+/+)、杂合型(gdf11+/-)和纯合型(gdf11-/-)3种基因型的小鼠;形态观察发现,与野生型小鼠相比,纯合型小鼠在围产期死亡且尾巴是截断的,骨架染色显示,野生型小鼠有13个胸椎和6个腰椎,纯合型小鼠有18个胸椎和9个腰椎.结果表明,敲除gdf11基因可能会影响小鼠胚胎和中轴骨发育从而改变小鼠的生长性状.

关键词：CRISPR/Cas9、生长分化因子11、基因型鉴定、基因编辑小鼠

所属期刊栏目：59

分类号：S852.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：新疆生产建设兵团国际科技合作项目;新疆生产建设兵团科技攻关计划项目;新疆生产建设兵团科技攻关计划项目

在线出版日期：2023-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：7-12