鸡白细胞介素18单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

为制备鸡白细胞介素18(chIL-18)单克隆抗体,本试验从被沙门菌感染过的鸡脾脏DNA提取物中扩增chIL-18 基因,并将其插入至原核表达载体pET-28a和pGEX-6p-1中,在大肠埃希菌中诱导表达并纯化重组蛋白;继而将纯化后的His-chIL-18蛋白免疫BALB/c小鼠,经3次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,以GST-chIL-18作为筛选蛋白通过间接ELISA方法对阳性杂交瘤细胞进行筛选,经3次亚克隆后,最后获得2株能稳定分泌IL-18抗体的杂交瘤细胞,分别命名为2A7和2G5.对抗体纯化后进行鉴定,结果显示,2株抗体亚型均为IgG1,亲和力解离常数(Kd)分别为4.4× 10-12和2.06 × 10-10,与chIL-1、chIL-10和chIFN-β 无交叉反应,可分别识别chIL-18第58～113位和第114～169位氨基酸区域.本试验制备的单抗为深入研究chIL-18的生物学功能及先天性免疫应答提供了有价值的手段.

关键词：鸡IL-18、原核表达、单克隆抗体

所属期刊栏目：58

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;现代农业产业技术体系建设专项

在线出版日期：2023-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：29-33