猪源牛病毒性腹泻病毒与猪瘟病毒一步法双重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用
为了建立一种快速鉴别检测猪源牛病毒性腹泻病毒(猪源BVDV)和猪瘟病毒(CSFV)的方法,根据GenBank中猪源BVDV和CSFV 5'UTR基因序列分别设计合成特异性检测引物,经一步法双重RT-PCR反应条件的优化,建立了鉴别检测猪源BVDV和CSFV的一步法双重PCR方法.该方法对猪源BVDV、CSFV、猪源BVDV/CSFV混合物可分别扩增出185、342、185 bp和342 bp的特异性条带,检测PRRSV、PRV、PPV、PCV-2、PEDV、JEV、TGEV均为阴性,对猪源BVDV、CSFV、BVDV/CSFV混合物的RNA检测灵敏度分别达0.95 ng、0.85 ng、8.0 ng,与猪源BVDV一步法RT-PCR检测方法、CSFV一步法RT-PCR检测方法的符合率均为100％.该方法在检测94份疑似CSFV感染病料样品的临床应用中,猪源BVDV阳性率为14.89％,CSFV阳性率为24.47％,猪源BVDV/CSFV混合感染率为5.32％.表明该一步法双重RT-PCR鉴别检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性、准确性和临床适用性,可用于临床病料样品中猪源BVDV和CSFV的快速鉴别检测,为基层兽医工作者开展猪源BVDV和CSFV的临床鉴别诊断和流行病学监测,提供了一种简单、有效的分子生物学鉴别检测方法.
猪源牛病毒性腹泻病毒;猪瘟病毒;一步法;双重RT-PCR;鉴别检测
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S852.65+1(动物医学（兽医学）)
南充市研发资金项目17YFZJ0067
2022-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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