猫杯状病毒蚀斑纯化方法的建立

摘要：

猫杯状病毒(FCV)是引起猫科动物呼吸道疾病的重要病原之一,常用患病猫的口鼻眼拭子进行病原学诊断或病毒分离,病原微生物的混合感染给病毒的分离纯化带来困难.为了快速获得纯化的FCV,本试验将临床检测FCV和猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)混合病料处理后进行蚀斑纯化及条件优化.结果 显示:将细胞数约为7×105个/mL的F81细胞以每孔2 mL铺入6孔板中,待病毒吸附90 min后覆盖浓度为2％的第1层低熔点琼脂糖溶液,于37 ℃、5％ CO2培养箱倒置培养48 h,然后加入含0.01％中性红的第2层低熔点琼脂糖溶液,于37℃、5％ C02培养箱培养,此条件所形成蚀斑的数量及大小均适合挑取.通过3次克隆纯化,挑取蚀斑进行了RT-PCR检测,成功从FCV和FHV-1的混合病毒中分离纯化到1株FCV.本试验首次建立的FCV蚀斑克隆方法,有助于FCV以及其他病毒的分离纯化,并为病毒的生物学特性试验提供科学依据.

关键词：猫杯状病毒;蚀斑纯化;病毒分离;病毒纯化

所属期刊栏目：57

分类号：S852.65+9.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中国农业科学院创新工程计划

在线出版日期：2022-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：15-19