西尼罗河病毒RT-RPA检测方法的建立及初步应用

摘要：

为建立快速特异的西尼罗河病毒(WNV)检测方法,本研究根据WNV基因保守区域基因序列,采用Primer Ex-plorer Version4设计特异性的重组酶聚合酶扩增(RPA)引物和探针.经过引物筛选和条件优化,建立了在39℃恒温条件下15 min内即可完成的实时荧光RT-RPA方法.本方法能特异性检测出WNV,且与蓝舌病毒(BTV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)核酸检测没有交叉反应.本方法灵敏性强,最小检出量为5.25×102拷贝/μL.采用创建的RT-RPA方法检测72份牛或猪的临床样品,结果与实时荧光定量PCR方法相符.说明本试验创建的WNV RT-RPA方法操作简便、灵敏度和特异性高,适用于WNV监测、基层实验室或出入境口岸对WNV的现场快速检测.

关键词：西尼罗河病毒、逆转录重组酶聚合酶扩增、等温扩增

所属期刊栏目：57

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划;国家重点研发计划

在线出版日期：2021-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：35-37,41,中插2-中插3