塞内卡病毒A间接ELISA检测方法的建立及应用

摘要：

为了建立塞内卡病毒A(SVA)血清学诊断方法,本研究体外融合表达结构蛋白VP2和VP3全长,并建立了间接ELISA方法,并利用建立的方法,进一步研究了多次感染SVA后VP2/3抗体的消长规律.本研究首先从塞内卡GD01/2017株中扩增出VP2和VP3基因,将其克隆至表达载体pET-30a,IPTG诱导表达目的蛋白,经检测蛋白以包涵体形式存在.大量诱导表达后收集纯化包涵体蛋白,用6 mol/L盐酸胍溶解包涵体并测定其浓度为5.3 mg/mL,利用该蛋白建立了SVA结构蛋白VP2/3的间接ELISA检测方法.本研究进一步利用该ELISA方法检测SVA GD01/2017株多次感染SPF猪后的血清样品,绘制了VP2/3抗体的消长规律图,为后续疫苗免疫程序的制定奠定基础.

关键词：塞内卡病毒A、结构蛋白、原核表达、酶联免疫吸附试验、检测

所属期刊栏目：56

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国检验检疫科学研究院所长基金项目;“十三五”国家重点研发计划课题

在线出版日期：2020-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：19-23,中插1