高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构蛋白(NSP2)基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计合成NSP2特异性的引物和TaqMan探针,建立了高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)检测方法.结果 显示,ddPCR最佳反应的引物和探针浓度分别为900 nM和250 nM;特异性和重复性检测结果表明,ddPCR具有良好的特异性和较高的重复性;灵敏度检测结果表明,ddPCR的检测灵敏度比荧光定量PCR高10倍;ddPCR的检测结果与标准品拷贝数的相关系数为R2=0.999 1,表明该方法检测结果具有良好的线性关系和可信度;用建立好的ddPCR方法对10份临床样品的高致病性PRRSV进行了拷贝数定量.

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、微滴式数字PCR、绝对定量

所属期刊栏目：55

分类号：S852.65+1(动物医学（兽医学）)

资助基金：北京市农业局农业科技项目;北京市科技重大专项课题

在线出版日期：2020-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：27-30