猪圆环病毒2型ORF3蛋白的原核表达及抗体检测ELISA方法的建立
通过外源表达PCV2ORF3蛋白,为ORF3蛋白的抗体制备和检测提供基础材料.根据PCV2的ORF3基因序列设计特异性引物,克隆ORF3全基因,构建重组原核表达质粒,转入大肠埃希菌进行表达,将纯化的蛋白包被ELISA板,建立ORF3抗体检测ELISA方法.结果 表明,获得了重组pGEX-6p-1-ORF3原核表达质粒,最佳表达条件为37℃,225 r/min,IPTG1.0 mmol/L诱导5h;建立的ELISA检测方法可以检测PCV2阳性血清,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清无交叉反应.本试验为ORF3抗体制备提供了基础材料,也为PCV2抗体检测提供了可选择方法.
猪圆环病毒2型、ORF3蛋白、原核表达、间接ELISA、抗体检测
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S851.34(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金31672580
2020-03-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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