CRISPR/Cas9介导敲除小鼠成纤维细胞MMP-2基因

摘要：

MMP-2与蹄叶炎的发生密切相关.本试验通过http://chopchop.cbu.uib.no/网站设计MMP-2的sgRNA,将sgRNA的合成物连接到经Esp3I限制性内切酶切割的lenticrispr v2载体上,构建完整敲除载体;并将该载体转染到小鼠成纤维细胞中,通过Western Blot检测MMP-2蛋白表达量.经菌液PCR鉴定和PCR产物测序表明载体构建成功;Western Blot结果显示,基因敲除组的MMP-2蛋白表达量明显降低,表明成功敲除小鼠成纤维细胞中MMP-2基因.为进一步在细胞层次研究MMP-2基因对蹄叶炎作用及机理提供了条件.

关键词：CRISPR/Cas9、MMP-2基因、载体构建、敲除

所属期刊栏目：55

分类号：S865.1+3(狩猎、野生动物驯养)

资助基金：青岛农业大学研究生创新计划项目QYC201708;山东省现代农业产业技术体系创新团队项目SDAIT-09-03

在线出版日期：2020-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：110-113,封3