补体C9分子原核表达与多克隆抗体的制备

摘要：

通过大肠杆菌表达系统表达补体C9重组蛋白,并制备其多克隆抗体,用于检测沉积菌体表面的补体C9分子;方法:通过PCR以兔肝细胞cDNA文库为模板扩增获得补体C9部分基因,并将其克隆至原核表达载体pEASY@-Blunt E1,经测序鉴定成功获得重组质粒pBlunt-C9.将其转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,经IPTG诱导,Ni-NTA亲和层析柱纯化后,获得重组蛋白.将纯化的重组蛋白免疫BALB/c雌鼠,制备抗C9的鼠源多克隆抗体.结果 显示,ELISA测得鼠抗C9多克隆抗体效价为1:12800,Western Blotting表明,制备的多克隆抗体可以特异性识别沉积在金黄色葡萄球菌和链球菌表面的C9分子,为进一步研究补体的生物学功能以及巩膜复合体(MAC)抗细菌感染机制奠定了基础.

关键词：补体、MAC、补体C9分子、多克隆抗体

所属期刊栏目：55

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：现代农业奶牛产业技术体系建设专项资金CARS-36

在线出版日期：2019-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：49-53