DNA甲基化参与LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞TNF-α表达

摘要：

为明确DNA甲基化是否参与LPS诱导的奶牛乳腺炎,本试验研究了DNA甲基化抑制剂对LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症因子表达的影响.首先用浓度为0 μg/mL、1 μg/mL、10 μg/mL和100 μg/mL的LPS分别处理奶牛乳腺上皮细胞6h、12 h、24h,荧光定量PCR(qRT-PCR)检测白介素-6(IL-6)、牛防御素(BNBD-5)和肿瘤坏死因子(INF-α)的mRNA表达水平,ELISA法测TNF-α的浓度,随后用浓度为1.0μmol/L、2.5umol/L和5.0umol/L的DNA甲基化转移酶抑制剂(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-AZA)分别处理奶牛乳腺上皮细胞24 h、48h、72 h,qRT-PCR检测TNF-α的mRNA表达水平.结果 显示LPS处理后,IL-6、BNBD-5、TNF-α的mRNA表达水平和TNF-α的蛋白水平显著上升;5-AZA处理后的TNF-α的表达量相对于LPS处理组显著上升.表明DNA甲基化参与LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞TNF-α的表达上调.

关键词：奶牛乳腺上皮细胞、LPS、5-AZA、TNF-α

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分类号：S857.2+6(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省重点科技攻关项目20150204074NY

在线出版日期：2019-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：30-32,36,中插2