重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究

摘要：

为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗.将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切割融合标签,用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验测定重组P128对奶牛乳房炎葡萄球菌抗菌活性.结果显示,融合蛋白以可溶性蛋白表达,两次相变循环纯化后的纯度达90％,产量为400 mg/mL;TEVp活性包涵体切割融合标签的效率接近100％,回收的重组P128纯度达98％,对牛源葡萄球菌的MIC和MBC分别为0.47μg/mL和1.88 μg/mL;除个别多重耐药菌株外,重组P128蛋白对多数金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的溶(杀)作用很强.这些研究结果表明,重组P128可用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗.

关键词：重组P128蛋白、融合表达、纯化、抗葡萄球菌活性

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分类号：S853.72(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省高校优势学科建设工程资助项目;江苏省人兽共患病学重点实验室资助项目

在线出版日期：2019-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：16-19,24