表达猪白细胞介素2(plL-2)重组乳酸杆菌的构建

摘要：

为了建立表达猪白细胞介素2(pIL-2)的重组乳酸杆菌,用PCR的方法从pMD-18T-pIL-2质粒中扩增pIL-2基因,并送至吉林省库美生物科技有限公司进行测序分析.将测序正确的PCR扩增产物与pSIP409表达载体链接,通过PCR和双酶切方法鉴定重组质粒.将重组载体电转至乳酸杆菌,通过SDS-PAGE电泳和Western Blot的方法鉴定pIL-2蛋白的表达,通过细胞粘附实验检测重组乳酸杆菌对猪肠上皮细胞IPEC-J2细胞的粘附性.结果显示,通过PCR和酶切的方法鉴定pMD-18T-pIL-2质粒中基因大小与pIL-2基因大小相似,吉林省库美生物科技有限公司测序结果与GenBank上pIL-2基因100％吻合.通过SDS-PAGE电泳和Western Blot的方法鉴定,重组乳酸杆菌表达蛋白为pIL-2蛋白.重组乳酸菌可使猪肠道上皮细胞IPEC-J2结构紧密,细胞间粘连蛋白表达量增多.表明重组乳酸杆菌表达的蛋白为猪白细胞介素2(pIL-2)蛋白.

关键词：白细胞介素2、乳酸杆菌、表达

所属期刊栏目：54

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省教育厅项目吉教科合字[2016]第206号;吉林农业科技学院大学生科技创新项目吉农院合字[2014]第010号;吉农院合字[2017]第047号

在线出版日期：2019-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：37-41