非洲猪瘟K205R蛋白的原核表达及多抗的制备

摘要：

为了表达非洲猪瘟K205R蛋白,进而制备其多克隆抗体,为非洲猪瘟血清学检测方法的建立奠定基础.以合成的K205R基因为模板,PCR扩增该基因序列,并将其克隆至原核表达载体pET-21a中,得到重组质粒pET-21a-ASFV-K205R.经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21 (DF3)感受态细胞,IPTG诱导表达His-ASFV-K205R融合蛋白,通过亲和层析的方法纯化His-ASFV-K205R融合蛋白.通过Western Blot方法鉴定融合蛋白的抗原性,以此融合蛋白为抗原免疫兔制备多克隆抗体,通过ELISA的方法测定多抗效价.结果表明,原核表达的K205R蛋白具有很好的抗原性,制备的兔多克隆抗体效价为1∶128 000,为建立非洲猪瘟的血清学检测方法提供生物材料.

关键词：非洲猪瘟、K205R、原核表达、多克隆抗体

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分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划课题2016YFD0501105,2016YFD0501106

在线出版日期：2019-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：33-36