双重RT-qPCR鉴别CSFV和BVDV方法的建立及初步应用

摘要：

为建立猪瘟病毒(CSFV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的鉴别检测方法,本研究根据CSFV Npro基因、BVDV 5'-UTR基因保守区域设计特异性引物和TaqMan探针,构建阳性重组质粒,优化反应条件,建立了双重RT-qPCR检测方法.该方法CSFV和BVDV的检测灵敏度均为100拷贝/μL,具有良好的特异性和重复性;对206份猪病料进行检测,CSFV阳性59份、BVDV皆为阴性,与本实验室常用单项RT-qPCR试剂盒检测结果一致.本研究建立的双重RT-qPCR整个检测过程不到3h,采取闭管反应,检测完毕直接处理,避免开盖造成气溶胶污染,具有简单、快捷、灵敏度高、生物安全性好等优点,可用于CSFV和BVDV的临床鉴别检测,为2种病毒的交叉污染的检测提供一种方便、快捷的方法.

关键词：RT-qPCR、CSFV、BVDV

所属期刊栏目：54

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东省现代农业产业技术体系特种经济动物创新团队SDAIT-21-05;山东省农业科技创新工程CXGC2016B14

在线出版日期：2018-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：28-31,35