白羽鹌鹑IFN-γ基因克隆、序列分析及原核表达
为了探究白羽鹌鹑IFN-γ的相关特性,本试验利用从刀豆素A诱导培养的鹌鹑外周血淋巴细胞中提取RNA,应用RT-PCR方法扩增IFN-γ基因片段并构建pEASY-Blunt-coIFN-γ克隆载体,测序表明,白羽鹌鹑IFN-γ(coIFN-γ)开放阅读框大小为495 bp,包含1个由24个氨基酸组成的信号肽序列和140个氨基酸组成的成熟肽序列,有2个糖基化位点.进化树结果显示,coIFN-γ基因与日本鹌鹑同源性最高,达到100%,与鸡形目动物差异不明显,同源性能达到95.6%.构建重组表达载体pET-32a(+)-coIFN-γ,并在大肠杆菌系统中诱导表达.丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,coIFN-γ重组蛋白大小约为40.0 kDa,均存在于包涵体中.通过本试验得到了coIFN-γ基因,原核表达coIFN-γ分子蛋白,并对其理化性质做了初步研究,为鹌鹑养殖业抗病毒生物制剂的研发提供理论基础.
白羽鹌鹑、干扰素、克隆、原核表达
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TQ929+1(其他化学工业)
东北林业大学大学生创新训练计划项目201610225075
2018-06-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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