抗猪PD-1单克隆抗体的制备与其生物学特性鉴定

摘要：

制备猪程序性死亡因子-1(PD-1)单克隆抗体,鉴定其生物学特性.以表达纯化的猪程序性死亡因子-1(Programmed death-1,PD-1)胞外区重组蛋白为抗原,免疫BALB/e小鼠,用细胞杂交瘤技术将免疫BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS0细胞融合,经多次克隆化培养,筛选分泌特异性抗猪PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株.结果:获得1株可稳定分泌抗猪PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2B5,Ig亚型为IgG1,细胞上清和腹水效价分别为1∶1 ×212和1∶2.048×105,酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和Western-Blot结果表明,该株单抗能特异性识别重组猪PD-1胞外区蛋白,流式细胞术结果表明,该单抗可以结合猪外周血单核细胞上PD-1蛋白.结论:成功制备了1株分泌抗猪PD-1单抗的杂交瘤细胞株2B5,为研究猪PD-1/PD-L1通路在猪传染性疾病中的致病机制提供了有力的检测工具.

关键词：PD-1、胞外区、单克隆抗体、效价

所属期刊栏目：53

分类号：S851(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31672540;河南省高等学校重点科研项目17A230019;新乡学院博士启动科研项目1366020053

在线出版日期：2018-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：31-33