鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒和禽肺炎病毒三重RT-PCR检测方法的建立

摘要：

本研究建立三重RT-PCR快速检测鉴别鸡新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(AIV)和禽肺炎病毒(APV)的方法.根据GenBank中H9亚型AIV HA基因和鸡NDV以及APV F基因的保守序列分别设计合成了三对特异性扩增引物,通过优化反应条件建立了三重RT-PCR检测鉴别鸡NDV、H9亚型AIV和APV的方法.对该方法进行特异性、敏感性和临床样品检测.特异性试验结果显示,所有参试的NDV、H9亚型AIV、APV分别扩增出大小为247 bp、569 bp和424 bp的片段,而对照的其他毒株不扩增;敏感性试验结果表明,本试验建立的方法能检测到10 pg的各自RNA模板.检测临床样品132份,NDV阳性26份,H9亚型AIV阳性6份,APV阳性2份,结果与病毒分离结果一致.PCR阳性产物测序结果与各自毒株序列100％同源.表明本试验建立的三重RT-PCR检测鉴别鸡NDV、H9亚型AIV和APV方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于临床快速、准确的鉴别检测.

关键词：鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、禽肺炎病毒、三重RT-PCR、检测

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分类号：S854.43(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家“万人计划”领军人才专项2016-37;广西科技厅重点研发计划桂科 AB16380054;人才专项桂科AD1638009;南宁市科学研究与技术开发项目20152308

在线出版日期：2018-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：6-9,13