一种基于CP204L基因的非洲猪瘟病毒Taq Man-MGB实时荧光PCR检测方法的建立

摘要：

基于非洲猪瘟病毒(ASFV) CP204L基因序列设计1对特异性引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件建立了一种检测ASFV的TaqMan-MGB实时荧光PCR方法.结果显示,该方法仅对ASFVDNA呈现特异性扩增,不与猪的其他常见病毒发生交叉反应,具有良好的特异性.该方法对标准对照质粒(PCR2.1-CP204L)的线性检测范围为4.2 ×101 ～4.2×109 copies/pL,标准曲线方程为Y=-3.452 3X +39.014,相关系数(R2)为0.998 8,检测下线为4.2个拷贝.对5个不同浓度(4.2×103 ～4.2×107 copies/μL)的质粒标准品进行4次双份样品的重复检测,Ct值变异系数均小于1.5％,表明该方法具有良好的重现性.用该方法对总计164份的进口猪临床样品和生猪肌肉样品进行ASFV检测,结果均为阴性.该方法的建立为活猪临床样品和生猪肌肉样品中ASFV检测提供了一种快速、敏感和特异的技术手段.

关键词：非洲猪瘟病毒、CP204L序列、TaqMan-MGB探针、实时荧光PCR

所属期刊栏目：52

分类号：S852.65+1(动物医学（兽医学）)

资助基金：天津市科技支撑项目13ZCZDNCO1300;天津市滨海新区惠民项目2013-BK15H013

在线出版日期：2016-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：23-25