10.3969/j.issn.0529-6005.2016.07.004
鉴别猪伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒双重PCR检测方法的建立
依据基因库中的猪伪狂犬病病毒(PRV)基因序列,分别设计了gE和gH两对引物,以PRV闽A株、Bartha (gE-)株和Norden(Tk-)株为模板,筛选最佳反应条件,建立了检测猪伪狂犬病病毒野毒株与疫苗毒株的鉴别PCR方法.该方法能从PRV闽A株、Norden(Tk-)株中扩增出一条355 bp的条带,但Bartha(gE-)株没有扩增出该目的条带.对正常细胞、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒(PCV)进行检测,结果均为阴性,没有出现交叉反应.在对单项PCR反应条件(引物浓度、Mg2+浓度、退火温度等)优化的基础上,建立了鉴别猪伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒的双重PCR检测方法,并分别用双重PCR和单项PCR检测15份临床病料,两者符合率为97.5%,表明该双重PCR检测方法有较高的敏感度,可以用于临床病料的检测.
双重PCR、伪狂犬病病毒、野毒和疫苗毒、鉴别诊断
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S852.65(动物医学(兽医学))
河南省重点科技攻关项目152102110092
2016-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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12-15,18