猪Sirt5基因的克隆及其腺病毒载体的构建和鉴定

摘要：

为了从猪脑中克隆得到Sirt5基因,并构建腺病毒载体,提取长白猪脑组织总RNA,利用RT-PCR和PCR扩增得到Sirt5基因.再将此基因克隆至穿梭载体上,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-IRES-Sirt5.经酶切线性化,电击转化已含骨架载体pAdEasy-1DNA的BJ5183+感受态菌,得到重组腺病毒质粒Ad-Sirt5.重组腺病毒质粒经酶切线性化鉴定.结果本试验获得的Sirt5基因与NCBI公布序列一致.利用细菌同源重组技术构建重组腺病毒载体,经酶切鉴定正确.表明本试验成功克隆得到Sirt5基因,并成功构建Sirt5基因的腺病毒载体.

关键词：猪、Sirt5基因、重组、腺病毒

所属期刊栏目：52

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省自然科学基金2014A030313449;广东省大学生创新训练项目1056413052;广州市科技惠民项目2014Y2-00116;广州市科学研究项目201510010057

在线出版日期：2016-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3-5