貂源绿脓杆菌流行株toxA基因克隆序列分析及原核表达

摘要：

为了研究貂源绿脓杆菌流行株toxA基因的遗传变异情况,并将toxA基因进行原核表达,本试验以貂源绿脓杆菌DNA为模板,经PCR扩增表达外毒素A蛋白的toxA基因,约1917 bp的片段,将产物克隆与pM D-18T载体并测序.结果表明,12株流行株的序列与GenBank中的标准产毒株PA103株和PA01株的遗传关系较近,显示外毒素A毒性的氨基酸均未发生突变,流行株变异不大.将该基因亚克隆到原核表达载体pET32a,转化BL21(DE3)感受态细胞,经不同浓度的IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE与Western Blot鉴定,结果表明,可产生相对分子量约为78 kDa的表达产物,成功地构建了外毒素A蛋白的重组表达系统.

关键词：绿脓杆菌、toxA基因、克隆、序列分析、原核表达

所属期刊栏目：51

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：青岛市科技计划基础研究项目11-2-4-5-3-jch;科技基础性工作专项SQ2012FY3260033;山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目BS2011SW010

在线出版日期：2015-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：38-41