新孢子虫NcGRA2t基因的原核表达及鉴定

摘要：

为研究新孢子虫GRA2t基因的原核表达及其表达产物的免疫活性,用EcoRI和XhoI限制性内切酶从pMD20-NcGRA2t上切下NcGRA2t基因,克隆入pGEX-4T1中构建NcGRA2t-GST融合蛋白基因的重组表达载体pGEX-4T1-Nc-GRA2t.经测序验证后,在大肠杆菌BL-21 (DE3)中诱导表达,表达产物采用谷胱甘肽-琼脂糖层析柱进行纯化.用Western blotting方法,以犬感染新孢子虫Nc1株的血清鉴定表达产物的活性.结果,构建了pGEX-4T1-NcGRA2t原核表达质粒,并在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达分子量为46 ku的NcGRA2t-GST融合蛋白,表达产物经谷胱甘肽-琼脂糖层析柱纯化后,得到N端带有GST标签的NcGAR2t蛋白.Western blotting结果显示,表达产物具有生物学活性.

关键词：新孢子虫、NcGRA2t、原核表达

所属期刊栏目：51

分类号：S852.72+3(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省现代农业产业技术体系建设专项资金资助201327

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：33-34,38