禽呼肠孤病毒(ARV)p10蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

为了深入研究禽呼肠孤病毒(ARV)的致病机理,从其基因组中克隆病毒非结构蛋白p10基因,并将其与原核表达载体连接,转入大肠杆菌BL21中,使其表达携带His标签的p10融合蛋白,经镍柱纯化得到高纯度重组p10蛋白,以该蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得2株能够稳定分泌针对p10蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为2B12与4H10.通过间接ELISA(Enzyme-linked immunosorbentassay)方法测定其腹水效价均为1∶1.01×107,亲合力解离常数(kD)分别为3.91×10-10、5.75×10-10,2株单抗的IgG亚型均为IgG2b.经Western Blot鉴定,该2株抗体均能特异性识别ARV感染DF-1细胞中的p10蛋白.这些单抗的制备为深入研究ARV的致病机理奠定了基础.

关键词：禽呼肠孤病毒、p10蛋白、原核表达、单克隆抗体

所属期刊栏目：51

分类号：S852.65+9.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31272543;现代农业产业技术体系建设专项资金NYCYTX-41

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：20-23,26