鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

为制备CIAV VP2单克隆抗体,将原核表达的His-VP2融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠.经4次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合.将原核表达的GST-VP2融合蛋白作为包被抗原,利用间接ELISA筛选阳性克隆.阳性细胞株经3次亚克隆后,获得3株稳定分泌抗CIAV VP2蛋白的杂交瘤细胞克隆,分别命名为3D7、3B8、2D3.经间接ELISA测定,以上3株杂交瘤细胞腹水效价分别为1∶8.0× 105、1∶4.0×105,以及1∶6.4×106,亲和力解离常数分别为7.34×10-11、2.65× 10-11,以及2.98×10-11.IgG亚类分别为IgG1、IgG2b以及IgG2b.经Western Blot试验证明,3D7株单抗能特异地识别CIAV VP2蛋白,其识别的抗原表位区域为VP2 N-端的20～40 aa.经IFA试验证明,3株单抗均能识别天然的CIAV VP2蛋白.此单抗为研究CIAV VP2的生物学功能和CIAV致病机理奠定基础.

关键词：鸡传染性贫血病毒、VP2蛋白、原核表达、单克隆抗体

所属期刊栏目：51

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目#31272543;现代农业产业技术体系建设专项资金#NYCYTX-41

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3-6,9