猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆与表达及间接ELISA方法的建立

摘要：

针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点编码基因片段(SBC,下同)设计合成1对引物,用PCR方法扩增SBC基因,将该基因片段定向插入到原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a-SBC.阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下表达大小约38 kD的蛋白,重组蛋白以包涵体的形式存在.Western blot分析表明,表达产物具有良好的免疫学活性.以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测TGEV抗体的间接ELISA (TGEV SBC-ELISA)方法.表明建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比血清中和试验高,可用于TGEV的检疫和流行病学调查.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒、克隆与表达、ELISA、诊断

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分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31072144,30901084;国家公益性行业农业科研专项201203056

在线出版日期：2015-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：7-10