牛肠道病毒2型VP1+表达和间接ELISA方法的建立与应用

摘要：

根据2005年从北京某牛场分离得到的一株牛肠道病毒2型(BEV-2)毒株序列,设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增BEV-2包含VP1(840bp)蛋白基因片段的VP1+(1 275 bp)序列,扩增产物克隆到pMD-T19,进行测序验证.验证该序列为目的片段后,将其克隆到表达载体pET-32a.重组质粒转化至Rosetta,经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示重组蛋白在大肠杆菌中高效表达.将重组蛋白作检测抗原包被酶标板,成功建立了检测牛肠道病毒2型抗体的间接ELISA方法.上述工作,为下一步BEV-2单克隆抗体的制备打下了基础.

关键词：牟肠道病毒2型、重组表达、间接ELISA

所属期刊栏目：50

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家质检总局科研项目“牛肠道病毒2型抗体及抗原ELISA检测技术研究”2013IK026

在线出版日期：2015-02-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：40-43