大肠杆菌植酸酶appA2基因真核表达载体的构建及在细胞中的表达

摘要：

根据已经公布的植酸酶appA2基因序列,设计合成了1对特异性引物,应用RT-PCR技术从大肠杆菌中扩增得到植酸酶appA2基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组真核表达质粒pcDNA-appA2,对重组表达质粒鉴定正确后,转染猪PK15细胞,经G418筛选后,通过实时荧光定量PCR检测细胞内appA2表达,同时测定细胞内植酸酶的活性,检测结果表明,本试验成功构建了pcDNA-appA2重组真核表达载体,转染细胞后appA2的表达量是对照组的1 686.55倍,同时具有较好的植酸酶活性,为通过生物反应器制备植酸酶研究奠定了基础.

关键词：植酸酶、appA2基因、真核表达载体、表达

所属期刊栏目：47

分类号：S852.61+2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目30830080;国家转基因新品种培育重大专项2008ZX08006-003

在线出版日期：2012-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3-5