新孢子虫SAG1-SRS2融合基因真核表达质粒的构建及表达

摘要：

根据犬新孢子虫NcSAG1-NcSRS2融合基因序列,设计了1对含有Kozak序列、终止密码子、BamH Ⅰ和XhoⅠ酶切位点的引物,以含有NcSAG1-NcSRS2融合基因的质粒pGEX-tNcP43-P36为模板,经PCR 扩增获得NcSAG1-NcSRS2融合基因片段,用BamH Ⅰ和XhoⅠ双酶切该片段,回收得到含有以上2 个酶切位点黏端的NcSAG1-NcSRS2融合基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pcDNA3.1 (+) 真核表达载体中,获得重组质粒pcNCSAG1-SRS2.经PCR 鉴定、限制性内切酶酶切分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性.将构建好的真核表达质粒转染到COS-7细胞中进行瞬时表达,经免疫荧光检测,证实了该载体能在细胞内进行蛋白表达.

关键词：犬新孢子虫、NcSAG1-SRS2融合基因、真核表达、转染

所属期刊栏目：43

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研项目20050019006;国家自然科学基金30571391

在线出版日期：2008-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3-5