10.3969/j.issn.0529-6005.2004.05.001
猪瘟病毒分离株E2基因的克隆与酵母表达系统转移载体的构建
用猪肾细胞(PK-15)繁殖猪瘟病毒(CSFV)分离株HL-LY,根据基因库已发表的CSFV E2基因序列,设计并合成一对引物,以CSFV总RNA为模板,通过RT-PCR技术扩增出约1.1kb的片段,即E2基因.将RT-PCR产物先克隆到pMD18-T载体上,构建了重组质粒T-E2,再通过双酶切亚克隆到表达载体pPIC9的多克隆位点(MCS)上,经酶切、PCR鉴定和测序分析,表明均已成功获得了CSFV E2基因的重组体pPIC9-E2.将该测序结果与国内几个毒株SHIMEN,C,C-V-LZ,GS-LT,GS-LX分别进行序列同源性比较,核苷酸同源性分别为96.51%,95.53%,89.12%,78.66%,77.23%;氨基酸同源性分别为97.32%,95.71%,89.54%,83.16%,83.42%.表明该毒株与国内标准毒株SHIMEN株和C株具有较高的同源性.
猪瘟病毒、E2基因、克隆、鉴定、同源性
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S852.65(动物医学(兽医学))
2004-07-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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