禽成髓性白血病病毒p27和gag基因的克隆

摘要：

禽成髓性白血病是由禽成髓性白血病病毒引起的一种禽白血病(Avian Leukosis).禽成髓性白血病病毒的gag基因具有高度保守性,其编码的群特异性抗原p27是禽白血病病毒所共有的主要核心蛋白,可做为禽白血病的诊断抗原.本实验采用AMV感染鸡胚成纤维细胞(CEF),提取感染细胞总RNA,用随机引物反转录成cDNA,根据已经发表的AMV BAI-A株序列设计两对针对p27基因和gag基因的特异性引物,分别进行PCR,成功地扩出p27基因和gag基因,其片段分别为793 bp和2.1 Kb.以gag基因的PCR产物为模版,采用p27的特异性引物也成功扩出p27片段.分别将p27,gag基因与pGEM-TEasy载体进行连接,转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,提取质粒,进行酶切鉴定.对含有p27基因的质粒进行测序,结果证明成功克隆了p27基因,间接证明了2.1 Kb的片段是gag基因.p27和gag基因的成功克隆为该病的探针诊断和gag基因的表达提供了基础.

关键词：禽成髓性白血病病毒、gag基因、p27基因、RT-PCR、基因克隆

所属期刊栏目：37

分类号：S858.326.5(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：8-10