miR-4319通过靶向TNFAIP3调控强直性脊柱炎成纤维细胞成骨分化

摘要：

目的 探讨miR-4319对强直性脊柱炎(AS)成纤维细胞骨向分化的影响机制.方法 原代分离培养AS成纤维细胞和正常成纤维细胞;脂质体法将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-肿瘤坏死因子-α诱导蛋白3(TNFAIP3)组(转染pcDNA-TNFAIP3)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-4319组(转染miR-4319 mimics)、miR-4319+pcDNA组(共转染miR-4319 mimics和pcDNA)、miR-4319+pcDNA-TNFAIP3组(共转染miR-4319 mimics和pcDNA-TNFAIP3)转染至AS成纤维细胞.实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-4319、TNFAIP3的表达;Western blot检测细胞TNFAIP3蛋白;双荧光素酶报告实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验、RNA下拉(RNA pull down)实验检测miR-4319与TNFAIP3的靶向关系;碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒、羟脯氨酸检测试剂盒、放免法骨钙素检测试剂盒检测成骨标志物ALP、胶原、骨钙素的含量.结果 与正常成纤维细胞相比,AS成纤维细胞中miR-4319表达显著升高,TNFAIP3表达显著降低(P<0.05),并且miR-4319靶向结合TNFAIP3.过表达TNFAIP3能上调AS成纤维细胞ALP、胶原、骨钙素的含量,而过表达miR-4319则可抑制AS成纤维细胞ALP、胶原、骨钙素的含量.过表达TNFAIP3还可部分逆转过表达miR-4319对AS成纤维细胞ALP、胶原、骨钙素含量的调控.结论 miR-4319可抑制AS成纤维细胞的骨向分化,其机制与miR-4319靶向TNFAIP3有关.

关键词：miR-4319、强直性脊柱炎、TNFAIP3、骨向分化

所属期刊栏目：25

分类号：R593.23(全身性疾病)

在线出版日期：2021-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：848-852