miR-17在体外脑缺血损伤中对Smad锚着蛋白的负性调控作用

摘要：

目的 探讨microRNA-17(miR-17)在体外脑缺血损伤中对Smad锚着蛋白(Smad anchor for receptor acti-vation,SARA)的调控机制.方法 使用大鼠高分化嗜铬细胞瘤PC12细胞,经连二亚硫酸钠(NaS2O4)构建氧糖剥夺模型(Oxygen Glucose Deprivation,OGD),计时0 h、1.5 h、3 h、6 h 和12 h,实时定量PCR 检测miR-17的表达变化.利用miR-17 mimic瞬时转染PC12细胞,western blot检测转染24 h、48 h和72 h后SARA蛋白表达情况.利用MiRDB和TargetScan网站预测miR-17对SARA的调控位点,并构建双荧光素酶报告基因载体.将报告载体与miR-17 mimic共转染,荧光素分析miR-17对SARA的调控靶点.结果 miR-17在OGD损伤早期表达上调,OGD 3 h时达高峰,超过OGD0 h组10倍.miR-17 mimic转染可显著下调SARA蛋白表达,转染24 h组SARA蛋白水平下调了57.01％.MiRDB和TargetScan网站预测miR-17对SARA的调控位点,荧光素酶报告基因检测示位点(57-64)和位点(403-409)是miR-17调控SARA表达的靶点.结论 miR-17可负性调控SARA蛋白表达.

关键词：microRNA-17、SARA、ActA/Smads

所属期刊栏目：24

分类号：R392

资助基金：吉林省科技发展计划项目;国家自然科学基金面上项目;国家自然科学基金青年项目;吉林省卫生科研人才专项项目

在线出版日期：2021-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2020-2024