柱前衍生高效液相色谱测定糖化血红蛋白

摘要：

目的：建立一种柱前衍生高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）测定糖化血红蛋白（HbA1c ）的方法。方法蛋白内切酶 Glu-C 将血红蛋白从β链 N 末端水解得到糖基化和非糖基化的六肽（HbA1c六肽和 HbA0六肽），HbA1c 六肽和 HbA0六肽与对氨基苯磺酸进行衍生反应，生成糖基化和非糖基化偶氮六肽衍生物，采用高效液相色谱对衍生物进行分离、测定，根据 HbA1c 衍生六肽和 HbA0衍生六肽的峰面积比计算样本中HbA1c的量。结果对高、中、低不同浓度血样进行反复多次分析，总变异系数 CV 分别为1．61％、1．74％和0．90％；HbA1c 浓度在0．3％-15．6％范围内，线性回归方程为Y ＝1005X＋7．26，R＝0．9959，线性关系良好；对低、中、高3个浓度的 HbA1c 国家有证标准物质（GBW09181、GBW09182和 GBW09183）进行测定，测定值与认证值的偏差在-3．81％-3．53％之间。采用本研究方法和常规方法分别对20 份 人 血 样 本 进行测定，相关回归方程为 Y ＝0．928X ＋0.407，相关系数为 R＝0．9965，二者有良好的相关性。结论建立了柱前衍生 HPLC 测定 HbA1c 的方法，本法具有很好的稳定性、精密度和准确性。

关键词：血红蛋白 A、糖基化、肽、柱前衍生、色谱法、液相

分类号：R446.11(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金项目号81171665，81201337，81301488

在线出版日期：2016-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1991-1995