荧光原位杂交技术检测非小细胞肺癌EGFR基因状态及与VEGF、D2-40、Ki-67表达相关性临床意义研究
文章编号：1007－4287（2014）12－1926－03<br> 荧光原位杂交技术检测非小细胞肺癌EGFR基因状态及与VEGF、D2-40、Ki-67表达相关性临床意义研究<br> 韩影1，刁文卓2，陈萍1，程薇1<br> （1．吉林市中心医院病理科，吉林吉林132011；2．吉林市中心医院神经外科）<br> 肺癌是严重危害人类生命安全的最常见的恶性肿瘤之一，其中以非小细胞癌居多，近年来其发病率和死亡率呈明显上升趋势。虽然近年来在诊断方法和治疗手段上有了很大发展，但是仍然不能得到满意的治疗效果，寻找有效的治疗手段一直是肿瘤学界研究的方向。近年来出现的新的治疗方法，即靶向治疗，使个体化成为可能，明显提高了肿瘤治疗的疗效。在肺癌靶向治疗中，两种小分子酪氨酸激酶抑制剂（即 Iressa 和 Tarceva）能特异地抑制具有EGFR基因变异的非小细胞肺癌（NSCLC）癌细胞的生长，使病人的预后能够得到改善。本研究通过荧光原位杂交技术对非小细胞癌 EGFR 基因状态进行检测，同时通过免疫组化染色检测 VEGF、D2-40、Ki-67的表达情况，进一步对两者之间的相关性进行研究，从而为临床诊断和治疗提供有效的理论依据。<br> 1．2．3 EGFR杂交确诊为肺非小细胞癌的肺组织石蜡包埋样本，切片厚度2．5μm，固定时间8-24 h之间，操作流程均按照说明书进行操作。<br> 1．2．4免疫组化染色所有切片均为2．5μm厚连续切片，取一组行 H E染色，再行 SP免疫组化法检测VEGF、D2-40和Ki-67三项指标。<br> 1．2．5结果判定 EGFR检测结果计数100个细胞，统计ratio值，若ratio＜2为阴性结果，提示该样本无EGFR基因扩增，若 ratio值＞2为阳性结果，提示样本中EGFR基因发生扩增。采用半定量双盲法，根据显微镜下免疫组化阳性细胞染色进行评价，VEGF阳性反应为细胞膜或细胞浆呈棕褐色，D2-40阳性反应为细胞质和细胞膜呈棕褐色，Ki-67阳性反应为细胞核呈棕褐色、颗粒状。每张切片随机观察5个高倍视野，每个视野计数100个肿瘤细胞，阳性细胞数≥50％为强阳性（＋＋＋），49％-25％为阳性（＋＋），25％-5％为弱阳性（＋），＜5％为阴性（－）。
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R73;S85
吉林市科技局科技计划项目201133146
2015-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共3页
1926-1928
